一、人工授精
1.方式
(1)产卵箱内产卵授精
产卵箱多用0.1升~0.5升的塑料或玻璃钢水槽制成,产卵前先在水槽中加满与亲参蓄养池或刺激池中水温一致的海水。一般备用两个产卵箱,一个放雌参、放卵子,另一个放雄参、放精子。见有产卵、排精迹象的亲参,及时将其捞至产卵箱内,注意捞时动作要轻,以免影响产卵数量。由于刺参的卵为沉性卵,所以在产卵过程中要不断搅动箱内水体或微充气,以免卵因缺氧而影响其发育。产卵的同时还要及时加入精液,精液不可加入太多,最好是多头雄参的混合精液。产卵箱内卵的密度不可太大,一般控制在200个/毫升~500个/毫升以内。大于此密度后,要及时将卵转移至孵化池或培育池内进行孵化培育。此方法可人为控制精液的添加量,不会出现多精受精现象,可大大减少幼体的畸形率。
(2)池内产卵授精
此种方法是让亲参直接在蓄养池或培育池内产卵、排精,然后将卵移入孵化池或在原池内进行孵化。一般雄参先于雌参排放,让雄参在池内先排放一会儿,使池内有一定的精子密度,以诱导雌参产卵。有雌参开始产卵后,将雄参从池内捞出,让雌参在池内产卵、受精。此方法因为精子量不好控制,容易发生精液过多而导致畸形率过高的现象。
2.影响受精的因素
(1)亲参的成熟度及精卵的质量
亲参的成熟度不够或过于成熟,均不会得到质量好的精卵,所以应及时观察亲参的性腺发育情况,把握好采卵的最佳时机。
(2)卵子的收容密度与水温
如果卵的收容密度过大,易造成卵的大量堆积、缺氧,影响卵的正常孵化。水温高时,多余的精子会加速水的败坏,影响卵的正常孵化。辽宁省海洋水产研究所的研究人员用10万个精子/毫升进行人工授精试验,在水温18℃~19℃时,当卵的收容密度为130个/毫升时,卵在排出后其持续时间可长达13小时,而卵的受精与孵化均未受到影响。而在水温为24℃~25℃时,收容密度如达650个/毫升时,卵排出后持续时间超过2小时后,其受精率及孵化率均明显下降。约经3小时后,其受精率为62%,但其孵化率仅为5%,几乎不能孵化。进行生产性育苗时,卵的收容密度应控制在10个/毫升~20个/毫升左右,一般情况下,最好控制在10个/毫升以下。因为刺参的卵为沉性卵,如池水深为1米,卵的密度为10个/毫升,则沉到池底后的密度则为1000个卵/平方厘米,即卵在池底的密度是相当大的。授精时水温控制在18℃~22℃,这与孵化和幼体发育的水温是一致的。
(3)精子的浓度
在生产过程中,很容易出现精子浓度过高的现象。这样容易发生多精受精,会明显降低卵的孵化率,增加幼体的畸形率和影响幼体的正常发育。所以应尽量控制精子的浓度,低倍镜观察每个卵子周围有3个~5个精子即可。如果精子浓度过高,要及时洗去。
二、孵化
在产卵箱中受精的,将卵计数后移入孵化槽或培育池内进行孵化。池内产卵授精的,在卵全部沉到池底后,将上、中层水放掉,将亲参全部捞出投入其他水池,洗卵2次~3次后进行卵的定量,然后进入孵化阶段。
1.方法
(1)孵化槽内孵化
孵化槽内孵化的密度较大,一般在100个/毫升~200个/毫升,孵化过程中定时搅动孵化用水或充气使卵处于悬浮状态,待卵发育至囊胚期时再将其按0.5个/毫升的密度移至培育池中继续培育。
(2)培育池内孵化
将受精卵按1个/毫升~2个/毫升的密度移入培育池中,因卵的密度较小,通常可静水孵化。
2.管理
(1)同水温孵化
海水或新加入的海水与受精时海水或原孵化水的水温温差不要太大,不应超过3℃,一般应在1℃~2℃以内。
(2)搅池或充气
在孵化过程中为避免受精卵过分堆积于池底应搅池或弱充气,使卵处于悬浮状态。搅池时一般用搅耙每隔30分钟~60分钟搅动一次池水。搅动时要上、下搅动,不要使池水形成漩涡导致受精卵旋转集中。